Nucleic acid detection fluorescence quantitative Ct value - usa ka parametro sa gugma-pagdumot

Ang "New Coronary Virus Pneumonia Diagnosis and Treatment Program (Trial Ninth Edition)" naggamit sa nucleic acid detection Ct value ≥35 isip usa sa importanteng basehanan sa pagpagawas sa isolation management o discharge.Busa, unsa ang girepresentahan sa Ct value sa nucleic acid detection kit?Ang mga kantidad ba sa Ct sa lainlaing mga kit ikatandi?Ang pagpaubos ba sa Ct value, mas maayo ang performance sa kit?
Ang Ct value (Threshold Cycle, Ct) mao ang gidaghanon sa PCR cycles kung ang intensity sa real-time nga fluorescence quantitative fluorescence signal milapas sa gitakda nga threshold.Ang nucleic acid detection kits nagkuha sa bag-ong korona isip usa ka pananglitan.Alang sa parehas nga reaksyon sa parehas nga kit aron mahibal-an ang duha nga mga sample nga adunay virus, A ug B, ang gidak-on sa kantidad sa Ct nagrepresentar, sa usa ka sukod, ang gidaghanon sa mga kopya sa viral gene, nga mao, ang viral load.Ang ubos nga Ct sa sample B, mas taas ang viral load.Ang kantidad sa Ct inversely proporsyonal sa viral load ug sa pagkatap niini.Ang mga bentaha ug disbentaha sa lain-laing mga real-time nga fluorescence quantitative kits dili mahukman pinaagi lamang sa gidak-on sa Ct value, tungod kay ang Ct values ​​sa lain-laing mga kit dili ikatandi.Ang performance evaluation sa kit kinahanglang sukdon gikan sa mga aspeto sa pagkasensitibo (minimum detection limit), specificity, precision, stability, ug diagnostic application.Ang matag tiggama sa reagent adunay kaugalingon nga napulog-walo nga mga klase sa martial arts, ug sila adunay kaugalingon nga mga gahum sa mahika nga magamit, mao nga dili nako hisgotan ang mga detalye dinhi.
Para sa conventional real-time quantitative PCR (QPCR) analysis instruments/systems, ang pagkuha sa Ct values ​​ug ang kaylap nga paggamit niini sa pathogen detection applications pamilyar sa tanan.Sa pag-uswag sa industriya ug pag-uswag sa teknolohiya, ang mga kagamitan sa QPCR ug mga reagents nakasugat og mga oportunidad ug mga hagit.Ang Yiou Think Tank (2021 Research Report sa China's Genetic Testing Industry: Technology) nag-analisar nga kadaghanan sa mga kompanya sa industriya sa QPCR sa akong nasud nag-atubang sa kasagarang mga problema base sa teknolohiya.Agig tubag sa kini nga mga problema, ang mga solusyon sa panguna gibahin sa duha nga mga tipo: pagpadali sa pagpaayo sa teknolohiya ug pag-deploy sa mga bag-ong teknolohiya.
Ang POCT alang sa QPCR molekular nga diagnosis usa sa mga direksyon sa pag-uswag sa industriya, ug ang pagpaayo sa pasundayag usa ka hinungdanon nga hinungdan aron mapadali ang aplikasyon sa teknolohiya.Para sa POCT equipment nga adunay single-sample throughput sa QPCR, unsaon pag-optimize sa Ct value sa key parameter sa usa ka reaction sa R&D?Ang parehas nga kagamitan, parehas nga sistema sa reaksyon, ug parehas nga konsentrasyon sa template, sa teoriya nga mas dako ang kantidad sa Ct sa usa ka reaksyon, labi ka ubos ang kahusayan sa enzyme sa reaksyon.
Sa proseso sa pagpauswag sa kaepektibo sa reaksyon sa enzyme ug pag-optimize sa kantidad sa Ct, usa ka tipikal nga 40 PCR cycle fluorescence quantitative amplification curve mahimong masusi una.Ang amplification curve sa hulagway sa ubos gibahin sa fluorescence background phase, exponential amplification phase, linear phase, ug plateau phase.Aron makab-ot ang usa ka ubos nga background sa fluorescence, kutob sa mahimo aron mailhan kini gikan sa fluorescence nga kantidad sa sayo nga exponential amplification, kinahanglan nga sulayan gikan sa carrier consumables reaksyon, primer probe design screening, ug reaksyon buffer system.Ang exponential amplification period mao ang pinaka direkta nga reaksyon sa enzyme activity, ug kini usab ang pamatuod sa hingpit nga koordinasyon sa POCT equipment, reaction carriers ug reagents.Niini nga panahon, ang pagkontrol sa temperatura sa kagamitan, pagkuha ug pagtuki sa optical signal, biocompatibility sa carrier, ug performance sa sistema sa mga reagents kinahanglan nga ipasibo ug sulayan sa tanang aspeto.Sa katapusan, ang tibuok nga pagpadako nahuman, ug ang mga resulta kinahanglan nga ipresentar sa usa ka estrikto nga data algorithm aron makakuha og makatarunganon nga Ct nga bili.

Usa ka gamay nga lakang sa pag-optimize sa kantidad sa Ct mao ang dili maihap nga mga lakang sa mga kawani sa R&D.Sa kabalaka ug kahinam sa adlaw ug gabii, sa matag higayon nga "ang mga bukid ug mga suba dili makita, ang mga willow mangitngit ug ang mga bulak hayag ug adunay laing baryo", nga naghatag kanato sa kaisug ug kadasig sa pagpadayon sa unahan. pag-usab.